خدمت تولید آنتی بادی منوکلونال
درباره خدمت
آنتی بادی های منوکلونال، آنتی بادی های تک دودمانه ای هستند، که از ادغام سلولی، لنفوسیت B و سلول میلومایی موش Balb/c تولید می گردند.
با توجه به اینکه این آنتی بادی ها فقط یک اپی توپ را شناسایی می نمایند، لذا این آنتی بادی ها ابزارهای ارزشمندی هستند، که به فراوانی جهت امور تحقیقاتی، تشخیصی و درمانی مورد استفاده قرار می گردند. بطور خلاصه جهت تولید آنتی بادی منوکلونال، به موش های Balb/c چندین نوبت آنتی ژن تزریق می شود. پس از اطمينان از ايمن شدن موش مورد نظر، موش را كشته و طحال را از بدن موش خارج و سلول های آن استحصال می گردد. سپس سلول های طحال با سلول سرطانی موش Balb/c موسوم به SP2/0 مخلوط گشته و فیوژن سلولی با استفاده از پلياتيلن گليكول (PEG) صورت می گیرد. سلول های حاصل از فیوژن در مجاورت محیط انتخابی HAT کشت داده می شوند، در اين حالت آمينوپترين موجود در HAT باعث مرگ سلولهاي SP2/0 ميشود این در حالی است که سلولهاي طحال كه فيوژ نشده اند نيز قدرت تكثير نداشته و پس از چند روز ميميرند. فقط سلولهاي هيبريدوم كه حاصل فيوژن بین سلولهاي SP2/0 و سلول طحال مي باشند قدرت رشد در محيط HAT را دارند. پس از چندین نوبت تعویض محیط سلول ها (Feeding)، با به حد نصاب رسیدن رشد هیبریدها، سوپرناتانت هیبریدها با استفاده از آزمون الایزای غیر مستقیم تست شده و چاهک های حاوی هیبرید مولد آنتی بادی منوکلونال مشخص می شوند.
با توجه به اینکه این آنتی بادی ها فقط یک اپی توپ را شناسایی می نمایند، لذا این آنتی بادی ها ابزارهای ارزشمندی هستند، که به فراوانی جهت امور تحقیقاتی، تشخیصی و درمانی مورد استفاده قرار می گردند. بطور خلاصه جهت تولید آنتی بادی منوکلونال، به موش های Balb/c چندین نوبت آنتی ژن تزریق می شود. پس از اطمينان از ايمن شدن موش مورد نظر، موش را كشته و طحال را از بدن موش خارج و سلول های آن استحصال می گردد. سپس سلول های طحال با سلول سرطانی موش Balb/c موسوم به SP2/0 مخلوط گشته و فیوژن سلولی با استفاده از پلياتيلن گليكول (PEG) صورت می گیرد. سلول های حاصل از فیوژن در مجاورت محیط انتخابی HAT کشت داده می شوند، در اين حالت آمينوپترين موجود در HAT باعث مرگ سلولهاي SP2/0 ميشود این در حالی است که سلولهاي طحال كه فيوژ نشده اند نيز قدرت تكثير نداشته و پس از چند روز ميميرند. فقط سلولهاي هيبريدوم كه حاصل فيوژن بین سلولهاي SP2/0 و سلول طحال مي باشند قدرت رشد در محيط HAT را دارند. پس از چندین نوبت تعویض محیط سلول ها (Feeding)، با به حد نصاب رسیدن رشد هیبریدها، سوپرناتانت هیبریدها با استفاده از آزمون الایزای غیر مستقیم تست شده و چاهک های حاوی هیبرید مولد آنتی بادی منوکلونال مشخص می شوند.
جهت بدست آوردن هیبرید پایدار، چاهک ها ی مثبت در آزمون الایزا با استفاده از رقت سلولي (Limiting Dilution) کلون می شوند به نحوی که درون هر چاهک فقط و فقط یک سلول قرار گیرد. عملیات کلونینگ 4 نوبت صورت می پذیرد و پس از هر بار کلونینگ، تمامی چاهک های حاوی تک سلولی الزاما باید در آزمون الایزا مثبت شوند. با توجه به اینکه تک کلون سلولی اولیه مثبت بوده و سایر تک کلون های منتج از آن نیز مثبت بوده اند و آنتی بادی اختصاصی تولید نموده اند، لذا آن را آنتی بادی منوکلونال می نامند. جهت تخلیص آنتی بادی منوکلونال می توان هم از سوپرناتانت هیبریدوما و هم از مایع آسیت استفاده نمود. تولید سوپرناتانت غلیظ از طریق کشت هیبریدوما در فلاسک های بزرگ و یا بیوراکتور و تولید آسیت نیز از طریق تزریق کلون هیبریدوما به حفره صفاقی موش Balb/c امکان پذیر می باشد.
آزمایشگاه تولید هیبریدوما با در نظر گرفتن شرایط کشور، با بهره مندی از اعضای هیات علمی و کارشناسان مجرب همواره آماده خدمت به مراکز تحقیقاتی، محققین و دانشجویان محترم در سراسر کشور می باشد.
خدمات کشت سلول و هیبریدوما:
- کشت انواع سلولهای سوسپانسیون و چسبنده
- فروش انواع رده های سلولهای جانوری
- ایجاد تک سلولی و تزریق به موش به منظور القای تومور
- تزریق آنتیژن به حیوان آزمایشگاهی
- انجام آزمون الایزا
- تولید آنتیبادی مونوکلونال (هیبریدوما)
- تولید آسیت
- تخلیص آنتیبادی با استفاده از ستون پروتئین G
- ساخت ستون کروماتوگرافی تمایلی (Affinity Chromatography)
- تخلیص آنتیبادی با ستون کروماتوگرافی تمایلی
خدمات کشت سلول و هیبریدوما:
- کشت انواع سلولهای سوسپانسیون و چسبنده
- فروش انواع رده های سلولهای جانوری
- ایجاد تک سلولی و تزریق به موش به منظور القای تومور
- تزریق آنتیژن به حیوان آزمایشگاهی
- انجام آزمون الایزا
- تولید آنتیبادی مونوکلونال (هیبریدوما)
- تولید آسیت
- تخلیص آنتیبادی با استفاده از ستون پروتئین G
- ساخت ستون کروماتوگرافی تمایلی (Affinity Chromatography)
- تخلیص آنتیبادی با ستون کروماتوگرافی تمایلی
مشخصات مدیر و کارشناسان آزمایشگاه:
- مدیر آزمایشگاه: علی احمد بیات، عضو هیات علمی پژوهشگاه ابن سینا
- کارشناس آزمایشگاه: فهیمه سوری
شماره تماس : 02122432020 - داخلی 210
آزمایشگاه مرکزی تولید هیبریدوما در طبقه اول پژوهشگاه ابن سینا واقع در دانشگاه شهید بهشتی قرار دارد.
تقویم کاری شنبه تا چهارشنبه ساعت 16-8
خط مشی تست یا خدمت با تعیین هزینه ها: با توجه به نوع نمونه و شرایط آزمون درخواستی متغیر خواهد بود.
لذا در پاسخ به اولین تماس متقاضی هزینه انجام آزمون اعلام می گردد.
*حداقل 48 ساعت قبل از ارسال نمونه با کارشناس آزمایشگاه هماهنگی صورت پذیرد
خط مشی تست یا خدمت با تعیین هزینه ها: با توجه به نوع نمونه و شرایط آزمون درخواستی متغیر خواهد بود.
لذا در پاسخ به اولین تماس متقاضی هزینه انجام آزمون اعلام می گردد.
*حداقل 48 ساعت قبل از ارسال نمونه با کارشناس آزمایشگاه هماهنگی صورت پذیرد